HG_T 3617-1999
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ID： |
2762B42DD801456B988CF53F97588E11 |
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文件大小(MB)： |
0.17 |
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页数： |
6 |
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文件格式： |
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日期： |
2005-8-25 |
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HG 3617-1999,前言,本 标 准 是根据我国以往制定的苏云金杆菌企业标准等有关材料，结合我国实际情况而制定的,本 标 准 对苏云金杆菌可湿性粉剂的要求、试验方法、抽样以及包装、运输等作了具体要求和规定，从,而为苏云金杆菌的生产提供了统一的技术依据,本 标 准 由中华人民共和国原化学工业部技术监督司提出,本 标 准 由化学工业部沈阳化工研究院归口,本 标 准 主要起草单位:中国农业大学应用化学系,本 标 准 参加起草单位:湖北省生物农药工程研究开发中心、济南科贝尔生物工程有限公司,本标 准 主 要起草人:刘丰茂、王开梅、钱传范、钟连胜、赵欣听、王绮文,1166,中华人民共和国化工行业标准,FIG 3617-1999,苏云金杆菌可湿性粉剂,Bacillus thuringiensis wettable powder,苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t. )是目前应用最广泛的一种微生物杀虫剂，它的主要杀虫,成分是伴抱晶体中的毒素蛋白，其中，对鳞翅目有毒力的蛋白相对分子质量为130000,范围,本标准规定了苏云金杆菌可湿性粉剂的要求、试验方法以及标志、标签、包装、贮运,本标准适用于由苏云金杆菌原药和助剂等制成的苏云金杆菌可湿性粉剂，主要用于防治鳞翅目害,虫,2 引用标准,下 列 标 准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所有版本均,为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性,GB /T 1 250-1989 极限数值的表示方法和判定方法,GB /T 1 600-1979(1989) 农药水分侧定方法,GB /T 1 601-1993 农药pH值的测定方法,GB /T 1 604一工995 商品农药验收规则,GB /T 1 605-19790989) 商品农药采样方法,GB 3 79 6-1983 农药包装通则,GB /T 5 451-1984 农药可湿性粉剂湿润性测定方法,GB /T 1 4825-1993 农药可湿性粉剂悬浮率测定方法,GB /T 1 6150-1995 农药粉剂、可湿性粉荆细度测定方法,HG 3 61 6-1999 苏云金杆菌原粉,3 要求,;一;外观:灰白色至棕揭色疏松粉末，不应有团块,苏云金杆菌可湿性粉剂应符合表1要求,表1 苏云金杆菌可湿性粉剂控制项目指标,项目,指标,32 000 IU/mg 16 000 IU/mg 8 000 IU/mg,毒素蛋白，% ) 4.0 2.0 1.0,毒力效价([PxIU/mg][HaIU/mg]) ) 32 000 16 000 8 000,pH值,.,6. 0- 7. 5,细度(75pm),% ) 98,1167,HG 3617一1999,表1(完),项目,指标,32 000 IU/mg 16 000 IU八ng 8000IU/mg,悬浮率(有效成分)，% ) 70,湿润时间，min 毛3,水分% 镇4. 0,注Px和H。分别为小菜蛾(Plutella xylostella)和棉铃虫(Heliothis armigera)的缩写,4 试验方法,除 另 有 说明，本方法所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液,4.1 抽样,按照 GB /T 1605-19790989)中第五章“粉剂和可湿性粉剂的采样”进行，用随机数表法确定抽样,的包装件。最终抽样量应不少于1009.,4.2 鉴别试验,当用 生 物 测定法检测产品质量产生疑问时，可用以下方法进行鉴定,用 十 二 烷基硫酸钠一聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法测定有效毒素蛋白的相对分子质量是,否为130 000，并同时测定毒素蛋白含最是否符合3.2指标的规定,4. 3 毒素蛋白含量的测定,毒 素蛋 白含量可以用SDS-PAGE一扫描法和SDS-PAGE一洗脱比色法两种方法进行测定，二者精密,度、准确度接近，前者由于自动化程度更高，而定为仲裁法,4.3.1 SDS-PAGE一扫描法(仲裁法),4.3.1.1 方法提要,用碱 性 溶 液处理苏云金杆菌可湿性粉剂伴抱晶体，使其降解为毒素蛋白，然后通过SDS-PAGE，依,蛋白质相对分子质量的差异，使毒素蛋白与其他杂蛋白分离，之后用薄层扫描仪或电泳图像扫描仪扫描,蛋白区带面积，进行定量,4.3.1.2 仪器、设备,电 泳 仪 ,夹 芯 式 垂直电泳槽(1.5 m m凹形带槽橡胶模框)、凝胶板面积145m mX100m m(1.5m m,12孔样,品槽模具),高速 薄 层 层析扫描仪或电泳图像扫描仪,离心 机 : 100 00r /min,分析 天 平 :精确至0.00 01 g ,4.3-1.3 试剂和溶液,过硫 酸 按(AP),十 二 烷 基硫酸钠(SDS),四 甲 基 乙二胺(TEMED),氢 氧 化 钠,30% 丙 烯 酞胺:称取丙烯酞胺30g ，亚甲基双丙烯酸胺(原称:甲叉双丙烯酸胺)0.8 g ,溶于100m L,蒸馏水中，过滤，于4℃暗处贮存备用,1m o t/L ,PH8.8三经基甲基氨基甲烷-HCI缓冲液:称取三经基氨基甲烷30.25 g 溶于蒸馏水中,用浓盐酸调至pH8.8 ，用蒸馏水定容至250m 工,1m ot /L ,pH6.8三Iq基氨基甲烷-HCI缓冲液:称取三9基氨基甲烷12.10 g 溶于蒸馏水中，用浓,1168,HG 3617一1999,盐酸调至pH6. 8.用蒸馏水定容至100 mL.,电极 缓 冲 液:称取三轻基氨基甲烷3.03g，甘氨酸14.42 g ，十二烷基硫酸钠1g，用蒸馏……
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